本品是畢赤酵母(Pichia Pastoris)基因工程菌株,經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、分離純化,再經(jīng)冷凍干燥得到的重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶粉末。該重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶是來源于尖孢鐮孢(Fusarium oxysporum)的蛋白酶,是一種絲氨酸蛋白酶,能選擇地水解蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基末端所構(gòu)成的肽鏈,具有重組豬胰蛋白酶、重組牛胰蛋白酶相同的酶學(xué)性質(zhì)。
本品屬于基因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑,具有與天然胰蛋白酶相同的活性和特異性。本品活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如PMSF和TLCK等、金屬離子螯合劑如EDTA等的抑制。與重組豬胰蛋白酶等不同,該重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶不易自切,配制為細(xì)胞消化液后可在2-8℃穩(wěn)定存放。
產(chǎn)品優(yōu)勢:
無動(dòng)物源性:無動(dòng)物病毒、無致病物質(zhì)、無外源因子污染,安全性高。
不易自切,穩(wěn)定性較高。
合規(guī)性:生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求,符合GMP指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整:按客戶需求,可提供相關(guān)法規(guī)支持文件
產(chǎn)品中文名同義詞:胰液酵素、胰酶-EDTA溶液、蛋白酶類
注意事項(xiàng)與免責(zé)聲明
本品具有吸濕性,應(yīng)先平衡至室溫后再開瓶取用。
本品僅供科研生產(chǎn)使用,不得用于人體。
運(yùn)輸和儲存穩(wěn)定性
運(yùn)輸穩(wěn)定性:冰袋保溫運(yùn)輸,活性穩(wěn)定。
儲存穩(wěn)定性:儲存穩(wěn)定性:凍干粉在-15℃及以下條件下至少能穩(wěn)定存放24個(gè)月。 1mM鹽酸或50mM醋酸溶解后儲存于-15℃及以下,反復(fù)凍融10次,無活性損失。
推薦使用方法
蛋白酶切
1)將蛋白質(zhì)溶解在25mM Tris-HCl(pH7.0-10.0)緩沖液中。
2)將酶粉用1mM HCl(或25mM Tris-HCl,pH8.0)溶解,使酶液濃度為1-10mg/ml。
3)按照酶量:目的蛋白=1mg:50mg-1mg:500mg,或者酶量:目的蛋白=10U:1mg-100U:1mg,在pH 7.0-10.0條件下酶切
細(xì)胞消化
1)取酶粉,用HBSS平衡液(或其他適宜細(xì)胞消化的緩沖液,如需要加入 EDTA 其終濃度推薦 0-1mM,最好不超過 2mM),配制為蛋白濃度0.1-0.3mg/ml(或者酶活濃度300U/ml-1000U/ml)的消化液,輕柔混勻。
2)使用 0.22μm 濾膜對上述胰蛋白酶溶液過濾并轉(zhuǎn)移至無菌容器中。
3)該消化液可當(dāng)天按照要求直接使用(例如加入1ml至T25瓶,37℃消化細(xì)胞),也可在2-8℃條件下保存30天。(若需在2-8℃保存更長時(shí)間,可購買我公司產(chǎn)品TrypRE select。或與我公司技術(shù)人員聯(lián)系。)
持續(xù)更新中......
尖孢鐮孢
畢赤酵母
白色或類白色凍干粉
≥1000USP units/mg粉
≥2500USP units/mg蛋白
不低于30%
8.5~9.5
在緩沖液中溶解性良好
* 實(shí)際核心參數(shù)以產(chǎn)品每批次COA為準(zhǔn);