腸激酶（Enterokinase, EK）是一種高度專一性識(shí)別 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶，在Lys的C 端水解多肽。具有高度專一性，水解效率高的特點(diǎn)?？稍谳^寬的pH范圍(4.5~9.5)和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割融合蛋白?？沙ノ挥诘鞍踪|(zhì) N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標(biāo)簽。冀百康重組腸激酶采用重組畢赤酵母高效分泌表達(dá)技術(shù)，經(jīng)多級(jí)層析純化，制成的高純度、高活性重組牛腸激酶，不含其他蛋白酶。

應(yīng)用

• 用于融合蛋白的酶切，生物藥物生產(chǎn)

優(yōu)勢(shì)

• 無(wú)動(dòng)物源性：無(wú)動(dòng)物病毒、無(wú)致病物質(zhì)、無(wú)外源因子污染，安全性高。

• 純度高，比活高。

• 1000L級(jí)別以上生產(chǎn)規(guī)模，產(chǎn)品批次之間質(zhì)量穩(wěn)定。

• 合規(guī)性：生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求，符合GMP指導(dǎo)原則。

• 質(zhì)量文件完整：按客戶需求，可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。

產(chǎn)品中文名同義詞：腸蛋白酶、腸胨酶、腸激活酶、腸肽酶

本品僅供研究使用，不得用于動(dòng)物或人類的診斷或治療。

運(yùn)輸及儲(chǔ)存穩(wěn)定性

運(yùn)輸穩(wěn)定性：冰袋運(yùn)輸，活性穩(wěn)定。

儲(chǔ)存穩(wěn)定性：-15℃及以下，24 個(gè)月穩(wěn)定，25℃，一周內(nèi)無(wú)活.性損失。緩沖體系：50mM Tris-HCl，pH8.0，250mM NaCl，2mMCa2+，50%甘油。

凍融穩(wěn)定性：反復(fù)凍融 5 次，無(wú)活性損失。

推薦使用方法

• 25℃酶切條件為：25mM Tris-HCl pH8.0 體系中融合蛋白 0.1-1mg/ml（蛋白總量 50-100μg），重組 EK 0.1~2U,酶切 16~24 小時(shí)，用 SDS-PAGE 檢測(cè)酶切效果。

• 4℃酶切條件為：可在 4℃對(duì)底物進(jìn)行有效低溫酶切，但需要將酶切時(shí)間延長(zhǎng)至 48~64 小時(shí)，或增加 2-3 倍酶量。低溫酶切有時(shí)候可獲得比 25℃更好的酶切效果。

• 在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果會(huì)受影響?？蓞⒄找韵峦扑]方法進(jìn)行酶切：

1） 為獲得理想酶切結(jié)果，請(qǐng)將樣品透析到 25mM Tris-HCl pH 8.0 緩沖液中，再進(jìn)行酶切；

2） 若不便透析，可將樣品稀釋，咪唑含量在 100mM 以下，NaCl 濃度在 50mM 以下，甘油濃度 5% 以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白的比例不變（即 1U 酶切 500μg 蛋白）；

3） 如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種，且不便去除，此時(shí)適當(dāng)增加酶量或延長(zhǎng)酶切時(shí)間，也可 達(dá)到較好酶切效果。

可對(duì)酶切條件進(jìn)行優(yōu)化，例如緩沖液 pH，融合蛋白濃度，EK 的量，以及酶切時(shí)間，融合蛋白能在穩(wěn)定條 件下被酶切，用 SDS-PAGE 檢測(cè)酶切效果。

去除重組腸激酶的辦法：可使用胰蛋白酶抑制劑親和層析去除重組腸激酶。

注意：不建議 37℃條件下酶切，可能會(huì)有非特異性酶切出現(xiàn)。

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